Наименование вещества

ОРТОФЕН
(натрия диклофенак, вольтарен)

Структурная формула

Основные физические константы


Проба

Сыворотка, плазма

Экстрагент

Хлороформ свежеперегнанный

Хроматограф

Миллихром-4

Колонка

Сепарон С-18 RPS с размером гранул 5 мкм. Размер колонки - 64х2 мм.

Элюент

0.03 М ацетатный буфер рН 3.4-4.2 - ацетонитрил (50:50)

Градиент

-

Объем пробы

20 мкл

Длина волны

280 нм

Скорость потока

100 мкл/мин

Время выхода

  от 8 до 10 минут

Градуировочные параметры

  1000 нг ортофена в колонке соответствуют
примерно оптической плотности 350 mAU

Предел обнаружения

  Расчетный 200 нг в пробе крови (30 нг в колонке)

Кратко подробности (порядок операций, времена, аппаратура)

К 0.5 мл сыворотки крови добавляется 0.5 мл 1 N соляной кислоты. Смесь перемешивается. К полученной смеси добавляется экстрагент. Экстракция ведется на протяжении 25 минут путем мягкого встряхивания. После чего органическая фаза отделяется центрифугированием при 1500 об/мин на протяжении 40 минут. Слой органической жидкости отделяется пипеткой, после чего фильтруется (фильтр синяя лента). Фильтровальная бумага дополнительно промывается порцией хлороформа (до 2 мл) Отфильтрованный экстракт упаривается досуха в стеклянных пробирках в сухожаровом шкафу при 110 оС. Сухой остаток растворяют в 200 мкл элюента.
Степень экстракции при соотношении объемов водной и органической фаз 1:10 составляет примерно 0.5.

Предоставлено НПП "Наука Плюс"
21027, Винница, 27, а/я 3032


Назад